氨基酸（游離氨基酸）檢測

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氨基酸（游離氨基酸）檢測的重要性與應用

氨基酸是構成蛋白質的基本單元，也是生命活動中的重要活性物質。游離氨基酸（Free Amino Acids, FAAs）指未參與蛋白質合成的游離態(tài)氨基酸，廣泛存在于食品、藥品、生物體液及環(huán)境中。其檢測在食品營養(yǎng)評估、醫(yī)藥研發(fā)、農業(yè)檢測及臨床診斷中具有重要意義。例如，食品中游離氨基酸的種類和含量直接影響其風味與營養(yǎng)價值；醫(yī)藥領域需通過檢測游離氨基酸監(jiān)測藥物代謝或疾病標志物；在農業(yè)中，氨基酸肥料的質量控制也依賴于檢測。因此，建立科學、的游離氨基酸檢測方法至關重要。

檢測項目與目標物

游離氨基酸檢測通常包括以下核心項目：

• 必需氨基酸：如賴氨酸（Lys）、色氨酸（Trp）、蘇氨酸（Thr）等人體無法合成的氨基酸；
• 非必需氨基酸：如谷氨酸（Glu）、丙氨酸（Ala）、甘氨酸（Gly）等；
• 特殊功能氨基酸：如γ-氨基丁酸（GABA）、?；撬幔═au）等具有特定生理活性的物質。

檢測需覆蓋20種以上常見氨基酸，并根據(jù)樣品類型選擇目標物，例如食品中需分析呈味氨基酸（如谷氨酸），而臨床檢測可能關注支鏈氨基酸（BCAAs）的比值。

主要檢測儀器與技術

現(xiàn)代游離氨基酸檢測主要依賴以下儀器：

• 液相色譜儀（HPLC）：配備紫外（UV）或熒光（FLD）檢測器，適用于柱前衍生法；
• 氨基酸分析儀：采用離子交換色譜與茚三酮柱后衍生技術，專為氨基酸定量設計；
• 液相色譜-質譜聯(lián)用儀（LC-MS/MS）：具有高靈敏度與選擇性，適用于復雜基質中痕量檢測；
• 近紅外光譜儀（NIRS）：用于快速篩查，但精度較低。

標準檢測方法

常用檢測方法包括：

1. 柱前衍生法（如鄰苯二甲醛/巰基乙醇衍生）：
   • 步驟：樣品提取→衍生化→HPLC分離→檢測；
   • 優(yōu)點：靈敏度高，兼容常規(guī)HPLC設備；
   • 缺點：衍生條件需嚴格優(yōu)化。
2. 柱后衍生法（如茚三酮反應）：
   • 步驟：離子交換色譜分離→在線衍生→比色檢測；
   • 優(yōu)點：穩(wěn)定性好，適合批量分析；
   • 缺點：儀器專用性強，分析周期較長。
3. 質譜法：
   • 步驟：直接進樣或簡單前處理→LC分離→質譜定量；
   • 優(yōu)點：無需衍生，可同時分析多種氨基酸；
   • 缺點：設備成本高，需操作。

國內外檢測標準

游離氨基酸檢測需遵循以下標準體系：

• 中國標準（GB）：
  • GB 5009.124-2016《食品中氨基酸的測定》；
  • GB/T 18246-2019《飼料中氨基酸的測定》
• 標準：
  • ISO 13903:2005《動物飼料中氨基酸含量的測定》；
  • AOAC 994.12《食品中氨基酸的離子交換色譜法》
• 藥典方法：
  • 《中國藥典》2020年版通則（氨基酸測定法）；
  • USP-NF〈1052〉氨基酸分析

檢測過程中需嚴格進行質量控制，包括使用標準氨基酸混合溶液校準、加標回收率驗證（要求80%-120%）及重復性測試（RSD＜5%）。未來，隨著微型化檢測設備與人工智能數(shù)據(jù)分析技術的發(fā)展，游離氨基酸檢測將趨向化、智能化，為各領域提供更的技術支持。